




装柱。将柱底用棉花塞紧,树脂柱多少钱,不---海沙,加入约1/3体积(),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用()将其冲入柱中。
压实。沉降完成后,加入更多的,用双联球或气泵加压,树脂柱,直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
上样。干法湿法都可以。海沙是没---的。上样后,加入一些洗脱剂,树脂柱生产商,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面。
过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好,用梯度洗脱。收集的例子:10mg上样量,1g硅胶h,0.5ml收一馏分;1-2g上样量,50g硅胶(200-300目),20-50ml收一馏分。
检测。要更多地使用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。
送谱。收集的产品旋干,在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体,可过一小凝胶柱,作为送谱前的后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。
中压层析柱的吸附层析原理分析介绍
聚---薄膜层析
聚---对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚---薄膜之间吸附能力的大小。层析时,展层剂与被分离物在聚---膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚---膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程,就能导致分离物质达到分离目的。
中压层析柱适用于分子筛,树脂柱价格,离子交换,凝胶渗透与亲和层析。设计---,装柱简便,洗脱死体积小,具有---的耐化学腐蚀性,是生物化学、石油化工、化学分析、---诊断等实验室及化学制药的中试及---生产的层析工具。
柱层析技术
柱子规格的选择
市场上有各种规格的柱层析分离柱。柱子长了 ,相应的塔板数就高 ,分离就好。目前市场上的柱子 ,其径高比一般在1: 5~10范围 ,在实际使用时 ,填料量一般是样品量的 30~40倍 ,具体的选择要根据样品的性质和含量进行具体分析。如果所需组分和杂质的分离度较大 ,就可以减少填料量 ,使用内径相对较小的柱子 (如 2 cm × 20 cm的柱子 ) ;如果 rf相差不到 0.1,就要加大柱子 ,增加填料量 ,比如用 3 cm内径的柱子。
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