




---的不锈钢层析柱使用技巧
(1)---:中性---的吸附特性介于氧化铝和硅胶之间,主要用于分离甾体化合物和某些糖类衍生物。为了得到中性---,用前先用稀---,然后用---洗涤,用和蒸馏水洗涤至中性。
装柱子的技巧
柱层析的装柱非常重要,装柱的效果会直接影响层析分离效果。有湿法装柱和干法装柱等两种方法。湿法装柱很简单,使用也普遍, 就是先用比固定相多一倍的洗脱剂将固定相活成匀浆,柱子底部先用脱脂棉塞紧, 然后倒入洗脱剂将脱脂棉中气泡赶出。
用漏斗将活好的固定相倒入柱子中,树脂柱厂家供应, 打开底部活塞, 将柱子中高出固定相的溶剂放出。期间不断用橡皮棒敲打, 将固定相敲实,树脂柱价格, 做到密实均匀无气泡即可。
很多时候用加压的方法可以很地装好柱子,而且在柱子中没有气泡产生。
干法装柱与湿法装柱刚好相反的是,它是将干燥的吸附剂从柱子上端直接加入到一个空的柱子中, 然后用油泵抽柱子底部, 相当于减压过柱, 直到柱子变得很结实, 再用淋洗剂“走柱子” 。
干法装柱的一个缺点就是在装入洗脱剂后, 由于溶剂和固定相之间的吸附放热, 所以柱子容易变花,影响分离效果。
层析柱如何来选择层析柱的关键要考虑以下几点:两端的4f塞是否密封---,中间的玻璃管的透明度以及耐压度。是否有相应的转换接头来控制进料高度。层析柱的介绍层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。工业化玻璃层析柱层析柱主要是根据要分离的植物有效成份、化工中间体、化合物等物质与玻璃层析柱内的不同填料:一、在不同的亲和度,二、在不同浓度的酸碱液下,三、在不同的极性溶液下,四、一定压力下在填料上不同的流速下有层次的分层
一文了解亲和层析柱装柱注意事项
后一种方法洗脱时,选择一种与待分离物质有较强亲和力的物质加入洗脱液,这种物质与配体竞争对待分离物质的结合,在在适当的条件下,如这种物质与待分离物质的亲和力强或浓度较大,待分离物质就会基本被这种物质结合而脱离配体,从而被洗脱下来。例如用染料作为配体分离脱氢酶时,树脂柱厂家,可以选择nad+进行洗脱,nad+是脱氢酶的辅酶,它与脱氢酶的亲和力要强于染料,所以脱氢酶就会与nad+结合而从配体上脱离。
特---洗脱方法的优点是特---强,树脂柱厂家批发,可以进一步消除非特---吸附的影响,从而得到较高的分辨率。
另外对于待分离物质与配体亲和力很强的情况,使用非特---洗脱方法需要较---的洗脱条件,很可能使蛋白质等生物大分子变性,有时甚至只能使待分离的生物大分子变性才能够洗脱下来,使用特---洗脱则可以避免这种情况。
由于亲和吸附达到平衡比较慢,所以特---洗脱往往需要较常的时间和较大的洗脱条件,可以通过适当的改变其它条件,如选择亲和力强的物质洗脱、加大洗脱液浓度等等,来缩小洗脱时间和洗脱体积。
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