---的不锈钢层析柱使用技巧如果不能重结晶也没关系，树脂柱，直接过柱就行，树脂柱厂家， 样品会随着淋洗剂流动而慢慢溶解， 随着洗脱剂流出。有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如dmso等， 会随着溶剂一起走， 显色是一个很长的脱尾） ， 这时就必须用干法上柱了。干法过柱是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶， 拌匀后再旋去溶剂。一般样品和硅胶按 1：1 的量混合， 硅胶使用的量也可以少一些， 但是要---在旋干后， 不能看到明显的固体颗粒，让样品都吸附在硅胶的表面上。然后小心地加入到装好的柱子中， 加入洗脱剂洗脱。过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为：加压， 常压， 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度， 减少产品收集的时间， 但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是的， 但是时间也长，树脂柱供应， 例如一些天然化合物的分离，有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发， 有时会在柱子外面有水汽凝结， 另外有些比较易分解的东西可能得不到， 而且还必须同时使用水泵抽气， 噪音大， 时间长， 所以减压过柱用得比较少。
上样
1、干法上样
、制样：将物料用极性较大的且洗脱剂中需用的溶剂溶解成浆状（或溶液状），再加入硅藻土（或硅胶）充分混合，晾干；再粉碎成粉未状，混合均匀。
、将制好的样品，置于预柱中或层析柱上端硅胶床层的上面，铺平；再放上滤布（网），筛板，再按图装好柱上端封头。
2、 湿法上样
、制样：将物料用极性比硅胶小的溶剂（例如：、----混合液、、等）溶解或制成浆状，直接倒在层析柱硅胶床层的上面，铺平即可（如果上样液多，也可以用泵（或氮气）慢慢打（压）入柱中）。
、同上，放上滤布（网）筛板，装好上封头。
层析柱装柱步骤流程
1.hetp计算
所用样品为1.0%nacl或纯溶液，上样大约为总柱床体积的1%。对于34和50μm的填料，使用的线性流速应为30 cm/h，90μm的填料选择20 cm/h的线性流速。通过下式计算hetp:
hetp = l/n
其中l为柱床高度（cm），n为理论塔板数，n=5.54 (ve/wh)2；
ve为洗脱体积（ml），树脂柱生产商，wh峰高一半处的峰宽（ml）。
2.峰对称因子计算
洗脱峰的峰形应尽可能对称，即对称因子尽可能接近1。as按下列公式计算：
as = b/a
其中，a为峰高10%处的前半个峰宽，b为峰高10%处后半个峰宽。
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